蛋白表达/抗体定制

酵母表达系统.png

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服务概述

      酵母表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统,可以成功实现胞内表达或是分泌表达,且其放大培养基相对廉价,培养条件要求不高,适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样,酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保证蛋白天然构象的修饰,可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。

      酵母蛋白表达平台由多年从事酵母表达操作的实验人员组成,经验丰富,采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在最大程度上实现最高质量的蛋白表达。经客户反馈,以我平台所制备的蛋白原料为抗原所制备的单抗均具有很好的识别天然蛋白的优良特性。

服务流程

方案沟通 →接收订单→质粒构建→蛋白表达→蛋白纯化→ 成果交付

客户提供

目的蛋白信息或基因序列,质粒(也可以选择由本机构提供)

最终交付

纯化后蛋白纯品、表达菌株(收费);

蛋白表达结题报告,包括测序报告、实验条件、蛋白表达纯化检测结果。

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服务名称服务项目服务内容交付结果服务周期
酵母细胞表达服务经济型套餐原核克隆基因的获得核酸电泳图片2周
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体
转化DH5α
重组质粒大量制备
线性化重组质粒
优化表达电转化适宜的酵母宿主酵母核酸电泳图2-3周
随机挑10株单菌落进行PCR鉴定
表达及纯化从PCR鉴定阳性菌落中选取一株做1L体系的放大表达最终纯化产物SDS-PAGE及WB1-2周
发酵液上清处理及一步纯化
纯化产物SDS-PAGE及Western Blot1 L上清的纯化产物
酵母细胞表达服务标准型套餐原核克隆基因的获得核酸电泳图片2周
PCR扩增产物酶切连接到合适的载体
转化DH5α
重组质粒大量制备
线性化重组质粒
优化表达电转化适宜的酵母宿主酵母核酸电泳图5-6周
用遗传霉素G418进行多拷贝子筛选
对多拷贝子克隆进行RCR鉴定
选取40株多拷贝子进行小量诱导表达最终种子表达上清SDS-PAGE图
表达及纯化选取表达情况最好的,根据客户需要放大表达最终纯化产物SDS-PAGE及WB1-2周
发酵液上清处理及一步纯化
纯化产物SDS-PAGE及WB1L上清的纯化产物


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